实验室安全实验室生物安全操作

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1.生物安全操作手册

(一)基本内容

制定并采用生物安全手册,方便取阅;有从事病原微生物相关实验活动的标准操作规范。

(二)要求说明

(1)生物安全实验室应编写针对本实验室的生物安全手册或相关文件。实验室负责人应确保实验室工作全体人员了解生物安全手册的具体要求。

(2)涉及病原微生物操作时,须制定标准作业指导书(SOP)降低实验室生物安全风险。SOP手册应放在方便使用的地方。对SOP进行动态管理,定期或不定期进行评估和修改。

(三)常见错误或隐患

(1)未按要求制定与本实验室实验活动相匹配的标准操作规范、安全手册等。

(2)已制定针对本实验室的操作规范,未在实验室进行张贴,或者张贴位置比较隐蔽,不方便实验室人员查阅。

2.生物安全操作手册

(一)基本内容

BSL-2/ABSL-2及以上等级实验室,开展病原微生物的相关实验活动应有风险评估和应急预案,包括病原微生物及感染材料溢出和意外事故的书面操作程序。

(二)要求说明

(1)制定病原微生物实验室意外事故应急方案,包括组织机构、应急原则、人员职责、应急通信、个体防护、应对程序、应急设备、撤离计划和路线、污染源的隔离和消毒、人员隔离和救治、现场隔离和控制等。

(2)开展病原微生物相关实验活动前,必须根据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验室对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等因素进行危害评估,评估不通过的不能开展相应工作。

(3)学校要建立实验动物病原微生物应急处置措施。当发生一般病原微生物泄露时,选择合适的消毒液进行消毒处理。发生高致病性病原微生物泄露时,应立即向卫生主管部门报告,并采取措施防止高致病性病原微生物扩散。发生实验人员被实验动物咬伤、抓伤等意外接触暴露时,应立即紧急处理,必要时使用预防药物干预。

(4)制定实验室感染性物质溢洒应急处置规程。发生溢出事故以及明显或可能暴露于感染物质时,必须向实验室主管报告,采取合理应急措施。实验室应保存此类事件或事故的书面报告。

(三)常见错误或隐患

(1)BSL-2/ABSL-2及以上等级实验室,在开展相应实验时未进行风险评估。

(2)BSL-2/ABSL-2及以上等级实验室未建立包括应对病原菌丢失、遗漏、感染等事故产生应急预案。预案未经演练或者预案的解决方案和程序不合理,达不到要求。

3.生物安全柜

(一)基本内容

在合适的生物安全柜中进行实验操作;不在超净工作台中进行病原微生物实验。

(二)要求说明

(1)进行感染性微生物、病毒的操作容易产生气溶胶,因此不同生物安全等级的实验须在对应等级(类型)及以上生物安全柜中进行。

(2)生物安全柜使用注意事项:

①生物安全柜运行正常时才能使用;②生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板;③生物安全柜内应尽量少放置器材或标本,不能影响后部压力排风系统的气流循环;④所有工作必须在工作台面的中后部进行,并能够通过玻璃观察挡板看到;⑤尽量减少操作者身后的人员活动;⑥操作者不应反复移出和伸进手臂以免千扰气流;⑦不要使实验记录本、移液管以及其他物品阻挡空气格栅;⑧工作完成后应对生物安全柜台面进行消毒与清洁;⑨在生物安全柜内的工作开始前和结束后,安全柜的风机应至少运行5min;⑩在生物安全柜内操作时,不能进行文字工作。

(3)超净工作台是正压(风往外吹),因此不准在超净工作台中进行病原微生物实验。

(三)常见错误或隐患

(1)未选择合适的生物安全柜类型进行病原微生物操作。

(2)在超净工作台中进行病原微生物操作。

(3)生物安全柜内摆放物品过多,影响气流。实验结束后,未对工作台面进行消毒处理。

(4)生物安全柜和高压灭菌器缺少定期检测和维护。

4.高速离心机

(一)基本内容

安全操作高速离心机,小心防止离心管破损或盖子破损造成溢出或气溶胶散发。

(二)要求说明

(1)离心含有感染性物质的液体时,必须使用可封口的离心管/离心桶(安全杯)。

(2)未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂或怀疑发生破裂时,应关闭机器电源,让机器密闭等待气溶胶沉积。如果机器停止后离心桶发生破裂,应立即将盖子盖上,并密闭等待气溶胶沉积。发生以上两种情况时都应通知生物安全负责人。穿戴厚橡胶手套使用镊子清理玻璃碎片。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有灭杀活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中,然后回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭多遍,然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。

(3)放置离心管要平衡对称,以防引起离心机故障或离心管破损。

(三)常见错误或隐患

(1)使用质量不合格的离心管盛装生物样品进行高速离心实验。

(2)离心管或盖子破损造成溢出或气溶胶散发。

5.实验记录

(一)基本内容

有开展病原微生物相关实验活动的记录。

(二)要求说明

所有从事病原微生物实验活动的人都应有详细的记录,一旦发生传染事故可以溯源,防止事故蔓延。

(三)常见错误或隐患

未按照要求及时记录实验活动或篡改实验记录,或者有记录但达不到溯源的目的。

6.生物安全个人防护

(一)基本内容

有合适的个人防护措施,并规范执行。

(二)要求说明

(1)从事病原微生物操作的人员必须配备必要的个人防护装备,防护装备主要包括口罩、白大褂、连体衣、鞋套、护目镜、安全面罩、手套等。根据实验类型选择合适的防护用品,并在实验前仔细检查,确保防护有效。

(2)所有使用过的个人防护用品应进行消毒及无害化处理。实验室应制定严格的个人防护用品去污染的标准操作规程。

(3)实验室处理来自病人的含未知病原微生物样本时,最低需要在二级生物安全水平的实验室基础防护条件下开展。应遵循生物安全实验室的标准防护方法,采用隔离防护措施(如手套、防护服、护目镜等),在专用的安全装置中进行样本处理以及合适的消毒与灭菌处理。

(三)常见错误或隐患

(1)实验室未配备适合的防护用品。

(2)未对个人防护用品进行有效维护,防护效果达不到要求。

(3)必要时未对个人防护用品进行消毒和无害化处理。

(4)将使用过的个人防护用品私自带离实验室。

(5)一次性手套用后乱丢乱扔。

(四)典型图片

个人防护用品使用错误示例见图1。

图1个人防护用品使用错误示例

注:生物实验手套用后乱丢

7.防护手套

(一)基本内容

禁止戴防护手套操作设施设备(包括仪器、冰箱、电脑、电话、开关、门窗、柜子抽屉等)。

(二)要求说明

在从事涉及生物安全相关操作时使用防护手套是为了保护操作者避免微生物感染,防护手套往往会沾染微生物污染,戴防护手套操作其他设施设备时会导致微生物感染至这些设备,而这些设备是不隔离的。

(三)常见错误与隐患

戴防护手套操作仪器、冰箱、电脑、电梯、电话,开关门窗,柜子抽屉等设施设备。

(四)典型图片

防护手套使用错误示例见图2。

图2防护手套使用错误示例

注:戴实验手套操作电脑

8.不接打电话

(一)基本内容

做危险性生物实验时,不接打电话。

(二)要求说明

(1)在做危险性生物实验过程中不接打电话。

(2)如确需接打电话,请停止实验,除去实验手套,到安全地带进行。

(三)常见错误与隐患

(1)做危险性生物实验时接打电话。

(2)带着实验手套接打电话。

END

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